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簡(jiǎn)要描述:分子生物學(xué)熒光定量PCR 實(shí)驗(yàn),熒光定量 PCR,就是在 PCR 的擴(kuò)增過(guò)程中,通過(guò)熒光的信號(hào),對(duì) PCR 的進(jìn)程進(jìn)行實(shí)時(shí)的定性、定量檢測(cè),檢測(cè)方式有 SYBRGreen 染料法和 Taaman 探針?lè)▋煞N方式。
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分子生物學(xué)熒光定量PCR 實(shí)驗(yàn),是通過(guò)在PCR 反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)的變化實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)PCR 擴(kuò)增反應(yīng)中每一個(gè)循環(huán)擴(kuò)增產(chǎn)物量的變化,對(duì)起始模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)驗(yàn)采用兩種定量方式,即絕對(duì)定量和相對(duì)定量。熒光定量PCR 可用于mRNA 表達(dá)量水平檢測(cè)、MicroRNA 表達(dá)量水平檢測(cè)和基因拷貝數(shù)檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)的方法可分為SYBR Green I 法和TaqMan 探針?lè)ā?shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)已廣泛應(yīng)用于臨床及生命科學(xué)研究的各個(gè)領(lǐng)域中。在科研方面可定量分析各種基因的表達(dá)分析,基因突變和多態(tài)性分析,單核苷酸多態(tài)SNP測(cè)定及易位基因的檢測(cè);在醫(yī)療方面可用于免疫組化分析、臨床疾病早期診斷、病原體檢測(cè)、耐藥性分析、腫瘤微小殘留病變研究等。
華津生物擁有引物探針設(shè)計(jì)合成、標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)粒合成、DNA和RNA制備、各種型號(hào)的RT-PCR試劑盒以及一步法RT-PCR技術(shù)優(yōu)勢(shì)等整套R(shí)T-PCR解決方案。
分子生物學(xué)熒光定量PCR 實(shí)驗(yàn)技術(shù)優(yōu)勢(shì)
靈敏度高,可以檢測(cè)低拷貝基因
高精度,PCR擴(kuò)增階段包括3個(gè)階段:指數(shù)增長(zhǎng)期,線(xiàn)性增長(zhǎng)期和平臺(tái)期,96個(gè)重復(fù)指數(shù)增長(zhǎng)期表現(xiàn)出高精度,而平臺(tái)期則變化差異較大
定量能力強(qiáng),簡(jiǎn)單的流程就能得到高質(zhì)量的定量數(shù)據(jù);動(dòng)力學(xué)范圍寬,可以精確定量9個(gè)數(shù)量級(jí)的差異速度快,節(jié)省時(shí)間和勞力,不需要電泳檢測(cè);
安全,使用熒光染料發(fā)光,不用EB或放射性物質(zhì),極大降低對(duì)實(shí)驗(yàn)人員健康的威脅,重復(fù)性好。
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